金擔(dān)子素A（Aureobasidin A，AbA）是從絲狀真菌 Aureobasidium pullulans No. R106 中分離出來的環(huán)酯肽類抗生素，具有很強的抗真菌能力。AbA 作用機(jī)制是抑制酵母中 AUR1 基因（1，2）編碼的肌醇磷酰胺（inositol phosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，干擾鞘脂合成，從而殺死菌株。AbA在較低的濃度下（0.1-0.5 μg/mL）即可對酵母產(chǎn)生毒性。編碼IPC合成酶的基因研究較多的來自釀酒酵母菌的AUR1基因，以及構(gòu)巢曲霉的AURA基因，兩者具有同源性。通過對編碼 AUR1-C基因進(jìn)行突變即可使得菌株對AbA產(chǎn)生抗性，作為蛋白質(zhì)互作研究的報告基因。
因為AbA可以直接殺死敏感的酵母菌株，而不是延遲菌株生長，所以AbA篩選有利于陽性克隆的生長和識別。與營養(yǎng)報告基因（如 HIS3）進(jìn)行低嚴(yán)緊度初篩相比，AbA篩選大大消除了背景克隆。實際操作中，用AbA進(jìn)行初篩時會獲得更多克隆，之后再用 4 個報告子(AUR1-C，HIS3， ADE2 和 MEL1)進(jìn)行高嚴(yán)緊度的二次篩選以驗證陽性克隆。AbA非常適合用作陽性克隆子篩選用的藥物選擇性標(biāo)記；也是酵母單/雙雜交研究中理想的報告子，可以簡化酵母雙雜交文庫篩選。MEL1和lacZ分別編碼 a-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷酶，可以作用于相應(yīng)的底物X-a-Gal和X-Gal使酵母變藍(lán)。其中，a-半乳糖苷酶是外分泌酶，在酵母表面就能直接檢測到；β-半乳糖苷酶是內(nèi)分泌酶，需要將酵母破碎后才能檢測到。用藍(lán)斑顯示酵母細(xì)胞內(nèi)兩個蛋白的相互作用的方法不僅具有較高的敏感性，而且藍(lán)斑的深淺還可以反映兩個蛋白相互作用的強弱。
